装柱:在装柱前要用缓冲液充分洗涤和平衡交换剂，至达到所要求的pH，然后装 柱。一般是自然沉降装柱。把处理好的交换剂和起始级冲液混匀，使全部交换剂一次灌装 完，使其自然沉降，达到柱中不混有气泡.沉淀面要平。
加样:把要分离的物质溶液装人贮液瓶，打开开关，控制流速.直至 离子交换剂吸收量饱和，即达有效容量。
洗脱:先用起始缓冲液洗脱，把未吸收的物质洗出，然后改变缓冲液 pH和盐浓 度，把所要的物质洗下来。
使用过的树脂，经过处理“再生”，可反复使用。 分子筛过滤层析:分子筛是一类具有网孔结构的凝胶颗粒，所以又称凝胶过滤。它 的作用相当于筛子，但与普通筛子作用相反。凝胶床是由一种溶胀的多孔凝胶组成，当欲 分离的物质通过凝胶层析柱时.分子橄大的物质不能渗人凝胶颗粒内，只能沿溶胀的凝胶 颗粒间隙，随溶剂流动.阻碍力小，流程短，移动速度快，故先流出层析柱;而分子量小的物 质，可渗人凝胶颗粒，移动阻力大，流程长，移动速度必然慢，所以后流出层析柱。 分子筛过滤层析，条件温和，方法和操作简便，分离范围广泛，回收率高，并能达到比 较满意的分离效果。
对于生化物质的分离，特别是像酶这类有活性的物质，具有很大的有月薪优越性。